安定是一種使用廣泛的二氮雜卓類抗焦慮藥物, 主要治療官能病癥, 能治療患者焦躁、癲癇等癥狀。但由于該藥物具有成癮性, 且會不易被代謝出體外, 因此長期或過量服用出現中毒情況。目前關于安定含量的檢測分析方式大多需要依賴專門的檢測儀器。這類儀器的價格昂貴, 操作復雜, 并不能很好的在實際生活中得到應用。為提升安定含量檢測方式的操作性和公共性, 故采用紫外分光光度方式進行測量, 并探究出一套簡單易操作的檢測方式。
1 安定的概況
安眠藥的又稱為安定, 也叫做地西泮, 是白色或類白色結晶性粉末, 無明顯氣味, 味道微苦[1]。目前市面上所用的安眠藥屬于苯二氮雜卓類藥物, 能很好的誘導患者入睡, 延長睡眠時間并提升睡眠質量。安定是臨床廣泛使用的一種鎮靜藥物, 具有很好的催眠、抗癲癇、抗焦慮及中樞性肌肉松弛的作用。該藥的藥理是通過在大腦邊緣系統發生作用, 與中樞系統中的苯二氯卓受體進行有效結合, 進而促進Υ-氨基丁酸釋放或與突出傳遞的功效, 最終實現誘導患兒進入睡眠或鎮靜下來的目的[2]。安定的治療效果非常理想, 且對呼吸系統和肝酶的影響比較小, 即便是使用的劑量比較大, 也不會產生麻醉藥劑的特點。但安定藥物經肝臟分解后所產生的代謝物很難排除體外, 并且具有生物活性, 仍會繼續發揮藥效。長此以往, 必然會造成極大的副作用, 出現藥物中毒的情況。
目前安定檢測的技術主要有氣相色譜法、高效液相色譜法、液質聯用法、氣質聯用法、, 酶聯免疫法、薄層色譜法、高效毛細管電泳法、膠束電動毛細管色譜法和流動注射光度分析法等。但這些方法均需要依賴各種專業的儀器, 且所檢測樣品也需要經過提純、純化、衍生化生步驟, 如此不僅加大安眠藥中毒樣品中安定含量檢測的成本, 其復雜的流程也需要耗費大量的時間。這非常不適用需要盡快得出檢測結果的情況, 這也是局限安定檢測方式普及的重要原因。
2 安眠藥中毒樣品中安定含量的檢測
2.1 實驗材料
實驗儀器:UV-120-02型島津紫外-可見分光光度計和1厘米的石英比色杯;
實驗試劑:準備3mol/升的磷酸鹽溶液;稱取41.4g磷酸二氫鈉并加入水溶解至100毫升, 所獲得試劑待用;準備好乙醚或三氯甲烷的試劑;0.45mol/升氫氧化鈉;在1.8g的氫氧化鈉中加水溶解至100毫升;2mol/升鹽酸;安定溶液 (按標準為20μg/毫升, 可從市場上買到安定片在用水兌成標準溶液) 。
2.2 實驗方法
實驗的原理是依據安定的濃度是在2~20μg/毫升內, 且242nm和263nm處的光密度差值與安定濃度是呈正比關系的。
實驗步驟如下: (1) 取胃液0.5毫升加水溶解至5毫升, 或其他樣品5g或5毫升, 加入0.45mol/升氫氧化鈉, 使樣品的PH值為中性;依次加入0.25毫升的3mol/升的磷酸鹽溶液和30毫升的三濾甲烷 (或乙醇) , 振動搖勻;如果是胃液則要分出三氯甲烷, 如果使用的樣品則需要再加入10毫升的三氯甲烷, 搖勻后再次分出三氯甲烷, 將分出的三氯甲烷溶液合并在一起[3];
(2) 使用10毫升的0.45mol/升氫氧化鈉溶液洗滌三氯甲烷溶液, 一次即可;
(3) 將三氯甲烷通過干燥的濾紙, 濾入蒸發皿中, 等待揮干即可;如果使用的是乙醇, 則需要使用無水的硫酸鈉脫水后, 再進行揮干;
(4) 將樣品的殘留物使用10毫升的正己烷溶解, 隨后在用10毫升的2mol/升的鹽酸溶液反提取, 所得到提取也放入1厘米的石英比色杯中, 放置在紫外分光光度計中進行測定;將2mol/升鹽酸作為參數對比, 并詳細記錄其在242nm和263nm出的光密度;在另一份空白的檢查材料中加入5毫升的安定標準液作為對照物, 該檢查材料在此進行操作, 同樣記錄其在242nm和263nm處的光密度[4]。
按照公式:安定含量=樣品的光密度差值/標準對照的光明度差值×標準對照用的安定微克數量/標準對照2mol/升鹽酸反提取液的毫升數×樣品2mol/升鹽酸反提取液的毫升數/樣品的含量
2.3 實驗結果與討論
為驗證該檢驗方式的測量效果, 故本文抽取某院一疑似服用安眠藥自殺的患者的胃液為實驗樣本進行實驗。所抽取的胃液含量為0.5毫升, 按照上述的實驗方式與步驟, 最終測得患者胃液中有安定成分, 且含量為201ug/毫升, 充分證明該方式能有效測量出安眠藥中毒樣本中的安定含量, 為搶救患者提供重要的支持和依據。
安定是一種中樞神經抑制藥物, 其毒性一般比較低, 具有很好的安全性, 因此即便是長時間的少量或適量服用也不會出現明顯的中毒現象, 但會出現一系列的毒副作用, 如頭昏眼花、記憶力減退、精神疲軟等。但安定具有耐受性和依賴性, 很容易形成該藥物成癮, 長期大量的服用會引發慢性中毒的情況。長期服用安定會增加老年癡呆癥的患病率, 青少年由于身體發育尚未成熟, 肝、腎排毒代謝的功能整體較弱, 很容易增加深度昏迷或死亡的風險[5]。若安定與酒精一起服用, 將會加劇中毒的反應和癥狀。
有資料報道, 安定類的藥物至少只需要服用20克便可以致人死亡, 但使用安全治療劑量是雖然不會產生深度睡眠或昏迷, 但會引起意識障礙。如果患者服用超過200片的安定 (以市場常見規格為主) , 就會出現昏迷、血壓下降、呼吸困難, 甚至是死亡[6]。因此, 患者及時確診為安眠藥中毒, 并根據其病史、血液檢查、尿檢的結果, 盡快制定出有效的救治方案是非常重要的?？焖贆z測出患者體內安定含量, 能爭取到更多的搶救時間, 為治療方案的擬定提供更多的數據依據。
本文中所使用的方式操作簡單, 能快速測量出安定的含量。但需要注意的是, 一般安眠藥中毒樣品中, 尤其是胃液中的安定濃度比較大, 需要進行適當的稀釋, 或直接減少樣本的提取量。文中所提取的0.5毫升的胃液是經過10毫升的2mol/省的鹽酸反提取的, 而242nm處的吸光度為0.65, 263nm處的吸光度為0.21。而100μg/毫升的安定標準溶液在242nm處所測得的吸光度為0.504, 在263nm處測得的吸光度為0.140, 根據相關的公式可以推測出患者胃液中的安定含量為201.5μg/毫升。而樣品在鹽酸提取也中所獲得的安定含量為12μg/毫升, 是屬于2~20μg/毫升的范圍內的。由此可以得出, 該方式是能有效測量出安眠藥中毒樣本中的安定含量。并且在測試, 要根據具體的情況適當的稀釋或減少樣品的提取量, 以保證結果的準確性。
3 結語
隨著安定藥物的廣泛使用, 安眠藥中毒事件也變得愈加頻繁。為病人爭取更多的搶救時間, 確定病人安眠藥中毒中的安定含量是搶救該類病人的關鍵所在, 而這些卻都要依賴于快速、有效、準確的檢測方式。文中所講述的方式是對紫外分光光度的過程進行了一些改良, 簡化了其操作步驟, 讓其更具有可操作性。雖然該檢驗方式不能對中毒樣品, 尤其是胃液樣品進行直接檢測, 需要經過一定的稀釋或者減少樣品提取量才能使用。但隨著我國醫藥技術的不斷發展, 一定能研制出快速檢測中毒樣品中安定含量的方式, 或者發現能夠取代安定且更具有安全性, 對人體影響更小的安眠藥物。
摘要：由于誤服、過量服用及自殺服食安眠藥事件的頻繁發生, 因此檢驗出中毒藥品中的安定成分及含量, 對于服用的救治具有重要的意義。本文主要采取紫外分光光度法來檢測藥品中的安定含量, 并對該方式進行討論, 探究其在各實驗室應用的可能性。
關鍵詞：安眠藥,中毒,安定,檢測
參考文獻
[1] 賈瑜, 張德紅, 馮才茂, 馬孝斌.安定殘留危害及其檢測技術研究進展[J].農產品質量與安全, 2012, 02:47-50.
[2] 向甲甲, 劉曉華, 徐剛.苯二氮卓類藥物檢測方法[J].寧波化工, 2014, 01:6-9.
[3] 黃玉玲.安眠藥中毒樣品中安定含量的檢測[J].現代預防醫學, 2006, 12:2435+2440.
[4] 張澤楷, 張明時.恒溫-氣相色譜法同時測定司法鑒定中的安定和三唑侖[J].分析試驗室, 2008, S1:380-382.
[5] 陳建虎.固相萃取/離子阱氣相色譜質譜聯用對血液中多種安眠藥物的同時測定[J].分析測試學報, 2010, 01:84-87.
[6] 張東升, 龔燕, 蔡建榮, 趙曉聯.安定檢測方法的研究進展[J].飼料工業, 2013, 06:39-41.