中華蘆薈又稱斑紋蘆薈, 是庫拉索蘆薈的變種, 屬于可食蘆薈。具有一定的藥用價值。蘆薈多糖能扶正祛邪, 增強免疫, 美容護膚, 抗腫瘤, 降血脂、血糖, 有助于肝炎、腎炎、紅斑狼瘡等病的治療, 有利于老年人的保健[1]。
本文在參考傳統提取方法的基礎上, 創新性地提出酶-超聲雙輔助提取中華蘆薈多糖, 并通過單因素和正交設計實驗優化提取條件。
1 材料與方法
1.1 材料
無水乙醇、丙酮、乙酸乙酯、苯酚、濃硫酸、果膠酶、纖維素酶、中藥粉碎機、超聲清洗儀、烘箱、電子天平和紫外分光光度計。
1.2 方法
1.2.1 酶-超聲雙輔助提取中華蘆薈多糖
新鮮、肥厚的中華蘆薈若干, 清洗, 小心去皮, 取肉質部分, 攪碎, 加水浸泡過夜, 加果膠酶/纖維素酶作用2 h, 超聲恒溫水浴加熱, 4層紗布過濾得濾液, 濃縮, 攪拌, 滴加入乙醇溶液中, 5 000 r/min離心5 min, 取上清, 用丙酮、無水乙醇、乙酸乙酯洗滌離心得沉淀, 烘干。
稱取樣品若干溶于水, 移入2 m L比色管中, 加入1.0m L 6%苯酚溶液及5.0 m L濃硫酸, 靜置20 min, 搖勻, 40℃放置15 min。以空白組作試劑空白, 于490 nm處測吸光度值。
1.2.2 工藝優化實驗
酶種類:果膠酶/纖維素 (m L∶g) 為0∶0、0∶0.1、0.1∶0、0.2∶0.1、0.1∶0.2、0.2∶0.2、0.2∶0.3。料液比為1∶5、1∶10、1∶20。超聲時間:20、30、40、50、60 min。超聲溫度為40、50、60、70、80℃。超聲功率為40、60、80、100 W。超聲次數響:1、2、3、4、5次。乙醇濃度:滴加入1、2、2.5、3、3.5倍體積95%乙醇沉淀。
在單因素實驗基礎上設計正交設計實驗見表1。
2 結果與分析
優化實驗結果表明, 酶的加入有利于多糖的提取, 綜合考慮成本及效率, 確定纖維素酶:果膠酶 (v∶m) 比例為1∶2;溶劑的增加對產率為負增長, 說明溶劑的量不是提取的關鍵, 確定料液比1∶5;乙醇濃度為80%時, 蘆薈多糖提取產率最高。
超聲時間對多糖產率的幫助呈現先增后趨于穩定, 確定超聲時間應為50 min;超聲時間對多糖產率的幫助呈現先增后減, 確定超聲溫度為70 ℃。超聲功率和超聲次數對蘆薈多糖的提取產率影響均不是很大, 考慮能耗和效率, 最終超聲功率為60 W、超聲次數為3次;
正交試驗結果表明, 在4種因素的作用下, 對中華蘆薈多糖產率影響的排序為超聲溫度>超聲時間>料液比>乙醇濃度, 最終確定最佳提取條件為A3C3B3D2, 即超聲溫度80 ℃、超聲時間60 min、料液比1∶20、乙醇濃度80%。
3 結論與討論
本試驗優化了由酶-超聲聯用雙輔助提取中華蘆薈多糖的提取工藝, 最佳提取工藝條件為, 纖維素酶:果膠酶 (v∶m) 為1∶2、超聲溫度80 ℃、超聲時間60 min、料液比1∶20、乙醇濃度80%、超聲功率300 W、超聲次數3次。
摘要：提出了酶-超聲雙輔助提取中華蘆薈多糖工藝, 并優化提取條件, 最終獲得到最佳提取工藝條件為, 纖維素酶、果膠酶之比 (V∶m) 為1∶2、超聲溫度80℃、超聲時間60 min、料液比1∶20、乙醇濃度80%、超聲功率300 W、超聲次數3次。
關鍵詞：中華蘆薈多糖,酶,超聲,提取工藝
參考文獻
[1] 陳闖, 邵淑麗, 李懷永, 等.蘆薈多糖藥理作用及提取工藝研究[J].高師理科學刊, 2014 (4) :55-57