論文題目：烯丙孕素內服溶液的臨床藥理學與靶動物安全性研究
摘要：烯丙孕素（altrenogest,ALT）是一種人工合成的甾類孕激素,通過抑制促性腺激素分泌而調整母畜發情周期,在歐盟和美國批準用于母豬同期發情。因烯丙孕素解決了母豬批次化生產的關鍵技術,且內服給藥方便,歐美國家將其作為現代養豬生產中必不可少的同期發情調控劑。因此,研發烯丙孕素仿制藥對促進我國養豬業的集約化發展具有重要意義。本研究開展了0.4%烯丙孕素內服溶液的藥代動力學、臨床藥效、靶動物安全性和殘留消除試驗,評價其調控母豬同期發情的有效性和安全性,制定了給藥方案和休藥期,為其新獸藥注冊和臨床合理應用提供了科學依據。1烯丙孕素內服溶液在豬體內的藥代動力學研究16頭健康母豬采用雙處理、兩周期隨機交叉試驗設計,進行烯丙孕素內服溶液和進口制劑單劑量給藥的比較藥動學研究。采用高效液相色譜-串聯質譜法檢測豬血漿中烯丙孕素,所得血藥濃度-時間數據用Winnonlin5.2藥動學軟件處理。受試藥物的主要藥動學參數:峰濃度（Cmax）為227.59±83.35 ng/mL,達峰時間（Tmax）為1.16±0.52h,消除半衰期（t1/2）為3.63±0.72 h,平均滯留時間（MRT）為5.02±0.79 h,藥時曲線下面積（AUC）為1060.82±410.74（ng/mL）·h;進口制劑的主要藥動學參數:Cmax為152.83±80.34 ng/mL,Tmax為 1.58±0.85 h,t1/2為 3.45±0.63 h,MRT為 5.21±0.87 h,AUC為 786.09±401.91（ng/mL）·h。受試藥物的 Cmax顯著高于進口制劑（P＜0.05）,t1/2、Tmax、AUC和MRT等參數無統計學差異（P＞0.05）。與進口制劑相比,受試藥物的相對生物利用度（F）為134.95%。研究結果表明,受試藥物具有與對照藥物相似的藥代動力學特征,且吸收與利用程度更佳。2烯丙孕素內服溶液的臨床藥效學研究為評價烯丙孕素內服溶液調控母豬同期發情的臨床應用效果,選取性成熟的后備母豬191頭進行劑量測定試驗和擴大臨床試驗,根據母豬發情及妊娠情況評價其臨床藥效。在劑量測定試驗中,空白對照組以及烯丙孕素內服溶液低（10 mg/d）、中（20 mg/d）和高（25 mg/d）劑量處理組母豬從停藥到發情的間隔時間分別為11.71±5.39 d、5.21±2.65 d、3.35±0.66 d 和 3.45±0.81 d,發情率分別為 70%（7/10）、95%（19/20）、100%（20/20）、和100%（20/20）,各用藥組的發情間隔與空白對照組相比顯著縮短（P＜0.05）,據此將推薦劑量定為20 mg/d。在擴大臨床試驗中,受試藥物組和對照藥物對照組的母豬發情間隔分別為3.59±1.07 d和3.75±1.22 d,發情率分別為96.72%（59/61）和98.33%（59/60）,兩種藥物處理均表現出良好的同期發情效果且無顯著差異。上述研究表明,受試藥物按推薦劑量（20mg/d）連續給藥18d,可以調控母豬達到良好的同期發情效果。3烯丙孕素內服溶液對母豬安全性研究為評價烯丙孕素內服溶液對靶動物母豬的安全性,選取健康母豬24頭,隨機分為4組,分別為3個給藥組和空白對照組,給藥組分別按20mg/d、60 mg/d、100mg/d劑量（即1倍、3倍、5倍推薦劑量）內服給藥,連續18 d,比較給藥前后的臨床體征、血常規指標、血清生化指標及組織病理學變化。結果顯示:試驗期間各組別母豬臨床表現正常,給藥后的血常規和血清生化指標均在正常范圍內波動,受試藥物在5倍推薦劑量（100mg/d）范圍內對母豬血液生理生化功能和主要臟器未造成明顯不良影響。試驗結果表明,受試藥物按臨床推薦劑量（20 mg/d）內服給藥,對靶動物母豬的臨床體征、血液學和血液生化指標無明影響,臨床應用安全。4烯丙孕素內服溶液在豬體內的殘留消除研究為制定休藥期,選用20頭后備母豬進行烯丙孕素內服溶液殘留消除試驗。每頭豬按臨床推薦劑量（20 mg/d）內服給藥,連續給藥18 d,分別于停藥后6 h、1d、5 d、10 d和18 d各隨機屠宰4頭豬,采集肌肉、肝臟、腎臟、皮脂等組織樣品,采用經驗證的高效液相色譜-串聯質譜法（HPLC-MS/MS）測定豬可食性組織中烯丙孕素殘留量,將測得的各組織中烯丙孕素殘留量采用WT1.4休藥期軟件計算休藥期。試驗結果顯示,停藥6h后肝臟中藥物殘留量最高,為240.75μg/kg,其次依次是皮脂、肌肉、腎臟,平均殘留量分別為137.30 μg/kg、41.13μg/kg、40.62μg/kg。停藥1d時,肝臟、皮脂、腎臟和肌肉中平均殘留量分別降至72.93 μg/kg、33.75 μg/kg、19.63 μg/kg和8.95μg/kg。停藥5 d時,4頭豬中僅兩頭豬肝臟中的烯丙孕素殘留量高于最高殘留限量（MRL）,分別為6.59 μg/kg和2.88 μg/kg,所有豬的腎臟、皮脂和肌肉中烯丙孕素殘留量均低于檢測限（LOD）。停藥10 d時,所有組織中烯丙孕素殘留量低于LOD。研究結果表明,肝臟是烯丙孕素在豬體內殘留靶組織,建議烯丙孕素內服溶液的休藥期為9 d。
關鍵詞：烯丙孕素內服溶液;藥代動力學;臨床藥效;靶動物安全性;殘留消除;母豬
學科專業：獸醫博士（專業學位）
摘要
Abstract
符號說明
第一章 文獻綜述: 烯丙孕素的研究進展
1 理化性質
2 研制與應用概況
3 作用機理
4 藥代動力學
4.1 血液中烯丙孕素檢測方法
4.2 烯丙孕素在動物體內的藥代動力學
5 毒理學
5.1 急性毒性研究
5.2 生殖毒性研究
5.3 遺傳毒性和致癌試驗研究
5.4 環境毒理學研究
5.5 靶動物安全性研究
6 臨床應用
6.1 用于同步發情
6.2 用于提高動物繁殖性能
6.3 用于維持妊娠
6.4 用于抑制發情
7 殘留消除
7.1 動物源性食品中烯丙孕素殘留檢測
7.2 殘留消除動力學
8 本研究的目的與意義
參考文獻
第二章 烯丙孕素內服溶液在豬體內的藥代動力學研究
1 材料與方法
1.1 藥品與試劑
1.2 主要儀器設備
1.3 試驗動物
1.4 動物分組與給藥
1.5 血樣采集
1.6 試液的配制
1.7 血漿中烯丙孕素含量檢測方法的建立
1.8 數據分析
2 結果
2.1 血漿標準曲線
2.2 檢測限和定量限
2.3 回收率和精密度
2.4 方法的專屬性
2.5 穩定性試驗
2.6 烯丙孕素內服溶液在豬體內的藥代動力學特征
3 討論
3.1 血漿中烯丙孕素的檢測方法
3.2 烯丙孕素內服溶液在豬體內的藥動動力學特征
參考文獻
第三章 烯丙孕素內服溶液調控母豬同期發情的臨床藥效研究
1 材料與方法
1.1 試驗藥品
1.2 試驗動物
1.3 試驗動物選擇與淘汰
1.4 試驗動物飼養管理
1.5 劑量測定試驗
1.6 擴大臨床試驗
1.7 給藥方法
1.8 發情鑒定和人工授精
1.9 臨床藥效評價
1.10 數據處理
2 結果
2.1 劑量測定試驗
2.2 擴大臨床試驗
3 討論
3.1 烯丙孕素內服溶液的臨床應用現狀及給藥方案
3.2 烯丙孕素內服溶液調控母豬同期發情的臨床效果
參考文獻
第四章 烯丙孕素內服溶液對母豬的靶動物安全性研究
1 材料與方法
1.1 試驗藥品
1.2 主要儀器設備及試驗耗材
1.3 試驗動物
1.4 試驗動物選擇與淘汰
1.5 試驗動物飼養管理
1.6 試驗動物分組與給藥
1.7 臨床觀察
1.8 血常規指標與血清生化指標測定
1.9 尸體剖檢與組織病理學檢查
1.10 數據處理
2 結果
2.1 臨床表現
2.2 血常規指標與血清生化指標
2.3 組織病理學變化
3 討論
參考文獻
第五章 烯丙孕素內服溶液在豬體內殘留消除研究
1 材料與方法
1.1 藥品與試劑
1.2 主要儀器設備
1.3 試劑配制
1.4 試驗動物及飼養管理
1.5 給藥與采樣
1.6 豬可食性組織中烯丙孕素殘留量檢測方法的建立
1.7 豬可食性組織中烯丙孕素殘留量的測定
1.8 數據處理
2 結果
2.1 方法的專屬性
2.2 基質匹配標準曲線
2.3 檢測限和定量限
2.4 回收率和精密度
2.5 穩定性試驗
2.6 豬可食性組織中烯丙孕素殘留量
2.7 烯丙孕素內服溶液按推薦給藥方案的休藥期
3 討論
3.1 豬可食性組織中烯丙孕素殘留的檢測方法
3.2 烯丙孕素在豬組織中的殘留消除規律及休藥期
參考文獻
全文結論
致謝